mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)缀合物产品简介-自主发布-资讯-生物在线

mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)缀合物产品简介

作者:西安百萤生物科技有限公司 2023-10-18T00:00 (访问量:15661)

产品基本信息

产品名称 mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)缀合物

英文名称 mFluor™ Violet 450-Wheat Germ Agglutinin (WGA) Conjugate

供应商   :AAT Bioquest

产品货号  :25450

储存条件  在零下15度以下保存, 避免光照

产品规格  :1 mg

产品参数:

Ex (nm) 406        Em (nm)  445

分子量  N/A             Water

产品物理化学光谱特性

吸收(nm)         406

校正因子(260nm)  0.338

校正因子(280nm)  0.078

消光系数(cm-1M-1)350001

激发(nm)         406

发射(nm)         445

量子产额         0.811

产品概述

麦胚凝集素(WGA)是一种与N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸结合的凝集素。它是目前研究多、应用广泛的一类凝集素。WGA与糖缀合物结合,其衍生物和缀合物被广泛用于标记细胞膜和纤维化瘢痕组织,用于荧光成像和分析。WGA的糖结合特异性与β-1,4-GlcNAc-连接残基的序列,即几丁质酶有关。每个单体包含两个相同的非相互作用的结合位点,它们与3或4β-1,4-GlcNAc单元互补。在所检测的单糖中,只有GlcNAc与WGA结合。甘露聚糖不结合,而GalNAc只能弱结合。WGA与含有Galβ(1--4)GlcNAcβ(1--3)重复序列(即聚乳糖胺型聚糖)的大寡糖中的内部GlcNAc残基具有高亲和力结合。N-乙酰神经氨酸只参与与WGA的低亲和力相互作用。WGA表现出了丰富的糖类特异性结合模式,可用于复杂碳水化合物的结构分析。mFluor  Violet 450 标记的 WGA 被紫激光充分激发,在 445 nm 处发出亮蓝色荧光。mFluor Violet 450 WGA 缀合物保留了与唾液酸和 N-乙酰氨基葡萄糖残基结合的能力,增强了其在荧光成像和各种科学研究分析中的实用性。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供的mFluor Violet 450 WGA 缀合物。

 

适用仪器

荧光显微镜

激发    :406nm

发射    :445nm

推荐孔板:黑色透明

 

实验方案

样品分析方案

溶液配制

储备溶液配制 

mFluor Violet 450 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)

将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中,制成 2 mg/mL 的储备溶液。 注意:重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存,或在 -20 °C 下长期储存。

工作溶液配制 

mFluor Violet 450-小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物​​工作溶液 (1X)

将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。
注意:不同细胞系的优化染色浓度可能不同。 活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。 

操作步骤

1.活细胞染色
1.1 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
1.2 添加 100 µL mFluor Violet 450-WGA 工作溶液。
1.3 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。
1.4 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
1.5 使用 FITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。 

2.固定细胞染色
2.1 在PBS中使用4%的甲醛固定细胞。
注意:对于固定细胞膜染色,建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色,如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。
2.2 添加 100 µL mFluor Violet 450-WGA 工作溶液。
2.3 在室温下用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。
2.4 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
2.5 使用 FITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。

 

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